Infeksiøs mononukleose: Antistoffer mot Epstein-Barr-viruset i blodet

Infeksiøs mononukleose er en vanlig systemisk lymfoproliferativ sykdom, som oftest skyldes Epstein-Barr-viruset. Toxoplasma gondii og andre virus (CMV, humant immundefektvirus og humant herpesvirus type 6, anerkjent som årsak til plutselig eksantem) kan forårsake klinisk lignende sykdommer. Disse samme etiologiske midlene er antagelig i stand til å forårsake utvikling av kronisk utmattelsessyndrom.

Epstein-Barr-viruset er et virus fra herpesgruppen, har en tropisme for B-lymfocytter, vedvarer vedvarende i vertscellene som en latent infeksjon. Det er utbredt i hele verden. Etter struktur og størrelse er Epstein-Barr-viruset skilt fra andre herpesvirus, men varierer betydelig fra dem i antigeniske egenskaper. Viruset har et membran antigen (MA-membran antigen), et nukleært antigen (EBNA-Epstein-Barris nuklein antigen) og et viralt kapsid antigen (VCA).

Infeksjon oppstår når viruset overføres med spytt. Epstein-Barr-viruset ved inntak infiserer svelget epitel, forårsaker betennelse og feber - de typiske kliniske tegn begynte mononukleose. Strengt lymfotropt virus, bli S3α reseptor cellemembranen av B-lymfocytter det induserer proliferasjon av polyklonale B-lymfocytter med en tilsvarende økning i mandlene, systemisk lymfadenopati og splenomegali. B-lymfocytter transformeres (tilegne seg evnen til uendelig divisjon), og i fravær av en tilstrekkelig cellulær immunrespons, kan denne prosessen utvikle seg tydeligvis ondartet (for eksempel X-bundet lymfoproliferativ syndrom). Hvis de cellulære immunitetsfaktorene styrer replikasjonen av Epstein-Barr-viruset i kroppen, forsvinner de kliniske symptomene på infeksjonell mononukleose gradvis.

I likhet med andre herpesvirus, kan Epstein-Barr-viruset seg i en latent infeksjon (sitt DNA innbefattet i kjernen av en liten mengde av B-lymfocytter). Episodisk asymptomatisk reaktivering av infeksjon er vanlig, og ca 20% av friske unge udskiller Epstein-Barr-viruset med spytt. I individer med en skadet cellulær immunitet (for eksempel AIDS, ataxia-telangiectasia, hos transplantasjonspasienter) og kan utvikle en klar reaktivt infeksjon med håret leukoplaki, interstitiell pneumonitt, eller i form av et monoklonalt B-celle lymfom. Med Epstein-Barr-viruset er etiologien av nasopharyngeal carcinoma og Burkitt lymfom knyttet.

En av manifestasjonene av smittsom mononukleose er utseendet i perifert blod av atypiske lymfocytter (opptil 10% av det totale antall lymfocytter). Atypiske lymfocytter finnes i blodet fra begynnelsen av perioden av kliniske manifestasjoner av infeksjonen. Deres innhold i blodet når en topp på slutten av 2. Eller begynnelsen av 3. Uke og kan holde på dette nivået opptil 1,5-2 måneder. Fullstendig forsvinning forekommer vanligvis ved begynnelsen av 4. Måned fra sykdomsutbrudd. Tilstedeværelsen av atypiske lymfocytter er et relativt ufølsomt tegn på infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-viruset, men har en total spesifisitet på ca. 95%.

Proliferasjon av polyklonale B-lymfocytter i infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-viruset, frembringer et stort utvalg av antistoffer i pasienten, for eksempel IgM-anti-i (kald agglutinin), reumatoid faktor, antinukleære antistoffer. De fleste av de uvanlige Ig som vises i smittsom mononukleose kalles Paul-Bunnel heterophile antistoffene. Disse antistoffene tilhører klassen IgM, har de en affinitet for lam og hest røde blodceller, ikke er rettet mot hvilket som helst antigen Epstein-Barr virus. Heterofile antistoffer - Tilfeldige produkter B-lymfoid spredning (forårsaket av Epstein-Barr-virus), vises de i den første uken av infeksiøs mononukleose og gradvis forsvinner under rekonvalesens, er de vanligvis ikke påvist i 3-6 måneder.

Etter hvert som det første akutte infeksjonsstadiet blir latent, forekommer genomene av Epstein-Barr-viruset (unike antigener) i store mengder i alle celler, og det nukleare antigenet slippes ut i miljøet. Som svar på antigenet syntetiseres spesifikke antistoffer - verdifulle markører av sykdomsstadiet. Kort tid etter infeksjon av B-lymfocytter oppdages et tidlig antigen (EA), et protein som kreves for replikasjon av Epstein-Barr-viruset (og ikke en strukturell viral komponent). Til tidlig antigen i pasientens kropp syntetiseres antistoffer av klasser IgM og IgG. Sammen med det fulde viralet av Epstein-Barr-viruset, forekommer antigener av viralkapsidet (VCA) og membrantigenet (MA). Etter hvert som den smittsomme prosessen avtar, unngår en liten prosentandel av B-lymfocytter infisert med Epstein-Barr-viruset immunforstyrrelsen og beholder det virale genomet i latent form. Nukleært antigen (EBNA) av Epstein-Barr-viruset er ansvarlig for duplisering og overlevelse.

Laboratorietester kan oppdage antistoffer mot forskjellige antigener.

Fra de serologiske metodene for å diagnostisere smittsom mononukleose er Paul-Bunnel-reaksjonen (agglutinasjon) mest vanlig, med sikte på å detektere heterofile antistoffer i serum. Titeren av heterofile antistoffer 1: 224 og høyere i pasientens serum er anerkjent som diagnostisk signifikant, og bekrefter diagnosen infeksiøs mononukleose. Heterofil agglutinering er positiv hos 60% av ungdommen etter 2 uker og 90% etter 4 uker fra starten av kliniske manifestasjoner av sykdommen. Derfor er det behov for flere studier for å diagnostisere smittsom mononukleose: i løpet av den første uken av sykdommen (reaksjonen kan være negativ) og 1-2 uker senere (reaksjonen kan bli positiv). Innholdet av heterofile antistoffer minker etter slutten av den akutte perioden av den smittsomme prosessen, men deres titer kan bestemmes innen 9 måneder etter utbruddet av kliniske symptomer. Paul-Bunnel-reaksjonen kan vende fra positiv til negativ, selv mot bakgrunnen av gjenværende hematologiske og kliniske symptomer hos pasienten. Sensitiviteten til metoden hos voksne er 98%, spesifisitet er 99%. Hos barn med smittsom mononukleose før 2 år kan heterofile antistoffer kun påvises hos 30% av pasientene i alderen 2-4 år - i 75% over 4 år - i mer enn 90%. Sensitiviteten til metoden hos barn er mindre enn 70%, spesifisiteten er 20%. Reduksjon, og deretter økning av titer av heterofile antistoffer kan forekomme som respons på en annen infeksjon (oftest i virale infeksjoner i øvre luftveier). Paul-Bunnel-responsen er ikke spesifikk for Epstein-Barr-viruset. Titer av heterofile antistoffer gir ikke en kryssreaksjon og korrelerer ikke med spesifikke antistoffer mot Epstein-Barr-viruset, og det korrelerer heller ikke med alvorlighetsgraden av sykdomsforløpet. Testen er ubrukelig for diagnostisering av kronisk form av infeksiøs mononukleose (positiv i gjennomsnitt bare hos 10% av pasientene).

Titers 1:56 eller mindre kan finnes hos friske mennesker og hos pasienter med andre sykdommer (rheumatoid arthritis, rubella). Falske positive testresultater møtes svært sjelden.

For tiden for påvisning av antistoffer mot saue-erytrocytter ved hjelp av en fremgangsmåte av "single spot" (et lysbilde agglutinasjon), blir den brukt i utgangspunktet som en screeningstest. Ved følsomhet er den sammenlignbar med Paul-Bunnel-reaksjonen. Glide falske positive tester kan være omtrent 2% av studiene (leukemi, ondartet lymfom, malaria, røde hunder, viral hepatitt, karsinom i bukspyttkjertelen) og falske negative voksne - 5-7% av tilfellene.

Det skal bemerkes at spektret til diagnostiske testsystemer produsert av firmaer basert på bestemmelse av antistofftiter er meget bredt, så det er nødvendig å fokusere på den diagnostiske titer av antistoffer som er angitt i instruksjonene for testsystemer.

Dersom heterofile antistoffer ikke er identifisert, og kliniske bildet svarer til infeksiøs mononukleose, er det nødvendig å undersøke serum for spesifikke antistoffer av IgM og IgG. For påvisning av spesifikke antistoffer mot Epstein-Barr-virus ved hjelp av indirekte immunofluorescens-metoder (tillate å påvise antistoffer mot VCA og EA antigener) antialexin-immunfluorescens (påvise antistoffer til EA, VCA og EBNA-antigen) og IFA.

Antistoffer mot EA-antigen D-komponenten (anti-EA-D) vises selv i den latente perioden av den primære infeksjonen og forsvinner raskt ved utvinning.

Antistoffer mot EA-antigenet R-komponenten (anti-EA-R) kan detekteres 3-4 uker etter kliniske manifestasjoner av sykdommen. De vedvarer i blodserumet i omtrent et år, ofte oppdaget med atypiske eller langvarige strømmer av infeksjonell mononukleose. Vanligvis finnes disse antistoffene med Burkitts lymfom.

Antistoffer mot VCA klasse IgM (anti-VCA IgM) virker svært tidlig, vanligvis til kliniske symptomer, de oppdages ved sykdomsutbrudd i 100% tilfeller. Høyt titers forekommer i løpet av 1-6 uker fra begynnelsen av infeksjon, de begynner å synke fra 3. Uke og forsvinner vanligvis etter 1-6 måneder. Anti-VCA IgM er nesten alltid tilstede i serumet med aktiv infeksjon, slik at metoden for deres deteksjon er svært sensitiv og spesifikk for en akutt episode av infeksjonell mononukleose.

Antistoffer mot VCA-klasse IgG (anti-VCA IgG) kan opptre tidlig (i den første 4. Uke), og deres mengde når en topp ved den andre måneden av sykdommen. I begynnelsen av sykdommen finner de seg i 100% av tilfellene. Bare 20% av pasientene viste en 4 ganger økning i titeren i studien av parret sera. Titeren minker på utvinning, men er funnet innen flere år etter overført infeksjon, derfor er det ubrukelig for diagnosen infektiøs mononukleose. Tilstedeværelsen av anti-VCA IgG indikerer en tilstand etter infeksjon og immunitet.

Antistoffer mot EBNA (anti-EBNA) vises senere enn alle, er sjelden tilstede i den akutte fasen av sykdommen. Deres innhold øker i løpet av gjenopprettingsperioden (innen 3-12 måneder), de kan fortsette i blodet i mange år etter sykdommen. Mangelen på anti-EBNA i nærvær av anti-VCA IgM og anti-EA IgM indikerer en nåværende infeksjon. Påvisningen av anti-EBNA etter en tidligere negativ reaksjon indikerer en eksisterende infeksjon. Ved bruk av ELISA-metoden er det mulig å samtidig oppdage tilstedeværelsen av anti-EBNA-klasser av IgM og IgG. Hvis mengden anti-EBNA IgM er større enn anti-EBNA IgG, bør en akutt infeksjon vurderes, med omvendt forhold som det forrige.

Til fordel for en akutt primær infeksjon indikerer et eller flere av følgende symptomer tilstedeværelsen av:

• anti-VCA IgG (oppdaget tidlig, og senere blir innholdet redusert);
• Høy titer (mer enn 1: 320) eller 4 ganger økning i titer av anti-VCA IgG i løpet av sykdommen;
• en forbigående økning i titer av anti-EA-D (1:10 eller mer);
• tidlig anti-VCA IgG uten anti-EBNA, og senere - fremveksten av anti-EBNA.

Akutt eller primær infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-virus, ekskludert hvis titer av anti-VCA-IgG og anti-EBNA i serum ikke forandrer seg i løpet av studien tid (i den akutte fasen og gjenvinning).

Den konstante tilstedeværelsen av tidlig antigen og anti-VCA IgG i høy titere indikerer en kronisk fase av infeksjon.

Deteksjon av antistoffer mot Epstein-Barr-viruset brukes til å diagnostisere infeksiøs mononukleose og kroniske infeksjoner forårsaket av Epstein-Barr-viruset.

Antistoffer mot Epstein-Barr-virus kan detekteres i de følgende sykdommer: sekundær immunsvikt, inkludert HIV infeksjon, nasofaryngeal karsinom, Burkitts lymfom, CMV-infeksjon, syfilis, Lyme sykdom, brucellose, og andre.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]